尿中磺酸化胆汁酸的微量荧光分析法
来源期刊:分析试验室2008年第5期
论文作者:刘伟平 高秀峰 李永生
文章页码:13 - 16
关键词:磺酸化胆汁酸;胆汁酸磺酸酯酶;3β-羟类固醇脱氢酶;微量荧光分析法;
摘 要:检测尿中磺酸化胆汁酸(SBA)的浓度可判断人体肝胆系统是否正常。基于双酶催化反应和微量荧光毛细管分析技术,建立了一种新的用于尿中SBA测定的灵敏、准确、简便的微量荧光分析法。方法基本原理为:SBA在胆汁酸磺酸酯酶(BSS)催化作用下水解而脱磺酸基,生成3β-羟胆汁酸;后者在氧化型辅酶-βNAD+存在下,由3β-羟类固醇脱氢酶(3-βHSD)催化而转化为3-酮胆汁酸,同时-βNAD+被还原成NADH;通过NADH的荧光强度来定量SBA。本方法样品无需预处理,测定全过程仅需10 min。荧光强度与SBA浓度呈良好的线性关系,线性范围3.050μmol/L,方法检出限为2.2μmol/L,相对标准偏差(RSD)为3%。
刘伟平1,高秀峰1,李永生2
1. 四川大学华西基础医学与法医学院2. 四川大学化学工程学院
摘 要:检测尿中磺酸化胆汁酸(SBA)的浓度可判断人体肝胆系统是否正常。基于双酶催化反应和微量荧光毛细管分析技术,建立了一种新的用于尿中SBA测定的灵敏、准确、简便的微量荧光分析法。方法基本原理为:SBA在胆汁酸磺酸酯酶(BSS)催化作用下水解而脱磺酸基,生成3β-羟胆汁酸;后者在氧化型辅酶-βNAD+存在下,由3β-羟类固醇脱氢酶(3-βHSD)催化而转化为3-酮胆汁酸,同时-βNAD+被还原成NADH;通过NADH的荧光强度来定量SBA。本方法样品无需预处理,测定全过程仅需10 min。荧光强度与SBA浓度呈良好的线性关系,线性范围3.050μmol/L,方法检出限为2.2μmol/L,相对标准偏差(RSD)为3%。
关键词:磺酸化胆汁酸;胆汁酸磺酸酯酶;3β-羟类固醇脱氢酶;微量荧光分析法;