快速测定生物样品中蛋白含量的同步荧光法研究

来源期刊：分析试验室2009年第12期

论文作者：崔凤灵 闫迎华 张强斋 渠桂荣 卢雁

文章页码：9 - 13

关键词：脱氧尿苷;人血清白蛋白(HSA);考马斯亮蓝G-250（CBB）;同步荧光光谱;分子探针;

摘    要：最佳实验条件下,基于脱氧尿苷与人血清白蛋白（HSA）相互作用,导致血清白蛋白的同步荧光光谱发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中白蛋白的浓度呈良好的线性关系,建立了以脱氧尿苷为探针,运用固定波长同步荧光光谱快速测定生物样品中蛋白质总含量的新方法。深入考察了Δλ值、反应介质、试剂用量、离子强度、加入顺序、反应时间等因素对测定的影响。在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与血清白蛋白在2.76～524.4μg/mL范围内的线性相关系数为0.9991,方法的检出限可达0.11μg/mL。运用本方法对人血清、唾液和尿液等生物样品进行测定并进行加标回收实验,回收率在98.0%～102.5%之间。对11份空白溶液进行平行测定,相对标准差为1.2%。用经典的考马斯亮蓝G-250（CBB）法做了对照实验,两种方法测定结果基本一致。还考察了一些常见离子和有机物存在时对蛋白质测定的影响。本方法已用于血清、唾液和尿样等生物样品中蛋白质总量的快速测定。