大肠杆菌Rosetta(DE3)表达的呼吸道合胞病毒F2蛋白免疫学特性(英文)
来源期刊:昆明理工大学学报(自然科学版)2012年第2期
论文作者:井申荣 曾韦锟 黄芬 王钰宁 岳婷婷
文章页码:54 - 60
关键词:呼吸道合胞病毒;免疫学特性;F2蛋白;
摘 要:呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是引起5岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体,目前还没有安全有效的疫苗问世,因此有必要采取不同的策略加快研发预防性疫苗.本研究将RSV融合蛋白(F)的F2肽段基因插入到载体pGEX-6P-1谷胱甘肽-S-还原酶(GST)融合标签下游,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物GST-F2,融合蛋白纯化后免疫昆明种小鼠三次,ELISA测定小鼠血清抗体.结果表明免疫后的小鼠可以产生高滴度IgG、IgA(p<0.05)抗体,IgG1/IgG2a比值显著高于对照组,但在小鼠呼吸道粘灌洗液中没有产生sIgA(p>0.01)抗体.因此F2蛋白具有良好的免疫原性,引起Th2型免疫应答,是RSV疫苗的候选蛋白.
井申荣,曾韦锟,黄芬,王钰宁,岳婷婷
昆明理工大学生命科学与技术学院
摘 要:呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是引起5岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体,目前还没有安全有效的疫苗问世,因此有必要采取不同的策略加快研发预防性疫苗.本研究将RSV融合蛋白(F)的F2肽段基因插入到载体pGEX-6P-1谷胱甘肽-S-还原酶(GST)融合标签下游,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物GST-F2,融合蛋白纯化后免疫昆明种小鼠三次,ELISA测定小鼠血清抗体.结果表明免疫后的小鼠可以产生高滴度IgG、IgA(p<0.05)抗体,IgG1/IgG2a比值显著高于对照组,但在小鼠呼吸道粘灌洗液中没有产生sIgA(p>0.01)抗体.因此F2蛋白具有良好的免疫原性,引起Th2型免疫应答,是RSV疫苗的候选蛋白.
关键词:呼吸道合胞病毒;免疫学特性;F2蛋白;