偶氮硝羧-Sr（Ⅱ）β型配合物检测胃蛋白酶的研究

冯爱青¹，胡秋娈²，程彦伟¹，王瑞²，刘尚才³

1. 洛阳师范学院生命科学系2. 洛阳师范学院化学化工学院3. 洛阳正骨医院

摘 要：在pH2.6的Clark-Lubs缓冲介质中,紫红色的偶氮硝羧λmax为545 nm,与金属Sr（Ⅱ）生成稳定的β型蓝色配合物,其λmax为717 nm,红移172 nm。蛋白质（HSA）能与该配合物形成紫红色三元复合物,发生消光反应,吸光度呈对应波长下的负吸收。实验确定了反应的最佳条件,测定了有可能干扰的物质,探讨其β型配合物对不同蛋白质的响应情况,发现胃蛋白酶有较大灵敏度,ε=5.16×105L·mol-1·cm-1,在10～50μg/mL范围内遵循比尔定律。建立了以偶氮硝羧-Sr（Ⅱ）β型配合物与蛋白质发生褪色反应测定蛋白质含量的光度分析新方法,用于胃液中蛋白酶的测定,结果和经典方法吻合。

关键词：分光光度法;褪色反应;偶氮硝羧-Sr（Ⅱ）;胃蛋白酶;