酶联免疫法检测海洋贝类中的荧蒽
来源期刊：分析试验室2019年第2期
论文作者：李冰莲 杨光昕 谷麟
文章页码：196 - 201
关键词：荧蒽多克隆抗体;酶联免疫吸附法;贝类;
摘 要：分别以BSA和OVA为载体蛋白,利用活化酯法和混合酸酐法合成了荧蒽的免疫原和包被原,对新西兰大白兔进行免疫,制备出效价较高、特异性较好的荧蒽多克隆抗体。建立出一种检测贝类中荧蒽的间接竞争酶联免疫吸附方法（ic-ELISA）,优化了包被原、一抗、二抗工作浓度,包被时间、抗原抗体反应时间及封闭液等实验检测条件。该方法特异性强,稳定性和灵敏度高,线性回归方程为y=19. 97x+15. 495 （R2=0. 99）,线性范围为1～500 ng/mL,IC50为53 ng/mL,检出限为0. 94 ng/mL,回收率为81. 3%～102. 5%,RSD为2. 5%～8. 9%。将该法应用于实际贝类样品的检测,检测结果和HPLC相比,具有较好的相关性,该方法可用于实际样品中荧蒽的快速分析检测。
李冰莲1，杨光昕2,3，谷麟1
1. 上海理工大学环境与建筑学院2. 中国水产科学研究院东海水产研究所3. 农业部水产品质量安全控制重点实验室
摘 要：分别以BSA和OVA为载体蛋白,利用活化酯法和混合酸酐法合成了荧蒽的免疫原和包被原,对新西兰大白兔进行免疫,制备出效价较高、特异性较好的荧蒽多克隆抗体。建立出一种检测贝类中荧蒽的间接竞争酶联免疫吸附方法（ic-ELISA）,优化了包被原、一抗、二抗工作浓度,包被时间、抗原抗体反应时间及封闭液等实验检测条件。该方法特异性强,稳定性和灵敏度高,线性回归方程为y=19. 97x+15. 495 （R2=0. 99）,线性范围为1～500 ng/mL,IC50为53 ng/mL,检出限为0. 94 ng/mL,回收率为81. 3%～102. 5%,RSD为2. 5%～8. 9%。将该法应用于实际贝类样品的检测,检测结果和HPLC相比,具有较好的相关性,该方法可用于实际样品中荧蒽的快速分析检测。
关键词：荧蒽多克隆抗体;酶联免疫吸附法;贝类;
