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稀土离子对大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶动力学性质的影响

来源期刊:中国稀土学报2000年第2期

论文作者:涂华民 杨燕生 王恩多 李勇

关键词:稀土; 亮氨酰-tRNA合成酶; 氨酰化反应;

摘    要:采用含pTrc-99B/leuS2转化子的高表达菌株, 简便快速地提取、纯化大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶. 对部分稀土离子参与下的氨酰化反应表观稳态动力学性质进行了研究. 氨酰化反应所需的Mg2+有可能被稀土离子取代, 脱镁tRNALeu1与未脱镁tRNALeu1对ATP和亮氨酸的表观Km值明显不同. 高浓度ATP对脱镁tRNA显示抑制作用, 说明金属离子是氨酰化反应的底物之一.

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稀土离子对大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶动力学性质的影响

涂华民1,杨燕生2,王恩多3,李勇3

(1.河北师范大学化学系西校区,河北,石家庄,050091;
2.中山大学化学系,广东,广州,510275;
3.中国科学院上海生物化学研究所,分子生物学国家重点实验室,上海,200031)

摘要:采用含pTrc-99B/leuS2转化子的高表达菌株, 简便快速地提取、纯化大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶. 对部分稀土离子参与下的氨酰化反应表观稳态动力学性质进行了研究. 氨酰化反应所需的Mg2+有可能被稀土离子取代, 脱镁tRNALeu1与未脱镁tRNALeu1对ATP和亮氨酸的表观Km值明显不同. 高浓度ATP对脱镁tRNA显示抑制作用, 说明金属离子是氨酰化反应的底物之一.

关键词:稀土; 亮氨酰-tRNA合成酶; 氨酰化反应;

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