膜电喷雾质谱法快速检测临床样本中志贺毒素

韩友霞¹，濮吉^2,3，滕中秋^2,3，徐伟⁴，张玫^2,3

1. 北京理工大学医院2. 传染病预防控制国家重点实验室3. 感染性疾病诊治协同创新中心4. 北京理工大学生命学院

摘 要：志贺毒素是大肠杆菌O157:H7重要的毒力因子,是毒力最强的毒素之一。本文建立了采用膜电喷雾质谱（MESI-MS/MS）快速检测人粪便样本中志贺毒素的方法。将两种志贺毒素的特异性肽段作为检测目标物,在蛋白水平上对志贺毒素进行检测。对肽段YNDDDTFTVK（YK1）和YNEDDTFTVK（YK2）的母子离子对建立了定量检测方法,并对检测方法学进行了验证。实验结果表明方法具有良好的检测精密度、准确度以及回收率。MESI-MS/MS具有去除基质效应的能力,可对酶解后的混合蛋白样本实现直接检测,全部操作过程可在3 h内完成。方法有望推广至其它细菌毒素的检测,且有望与便携式质谱相结合实现现场快速检测。

关键词：快速检测;志贺毒素;膜电喷雾质谱;常压敞开式质谱;