分光光度法测定脱氧核糖核酸——基于其与亚甲蓝的反应
来源期刊:理化检验-化学分册2007年第11期
论文作者:司文会
关键词:分光光度法; DNA; 亚甲蓝;
摘 要:试验发现在pH 6.5的B-R缓冲溶液中在加脱氧核糖核酸(DNA)后亚甲蓝溶液在其吸收峰666 nm波长处的吸收明显减弱(即色泽减褪),而且吸光度的减弱(△A)程度与DNA的质量浓度在10.0 mg·L-1以内保持线性关系,其相关系数为0.999 8,此反应对DNA的检出限为0.10 mg·L-1,分别以蛋白酶、胰蛋白酶及溶菌酶作为基体定量加入DNA配制成3种合成样品,按所提出方法进行分析,测得回收率结果在98.4%~101.0%之间,分析结果的RSD(n=11)值在1.1%~3.1%之间.对反应条件(包括亚甲蓝的浓度、反应的温度、酸度及时间等因素)作了试验和选定,还对反应机理作了简要的讨论.
司文会1
(1.苏州农业职业技术学院,苏州,215008)
摘要:试验发现在pH 6.5的B-R缓冲溶液中在加脱氧核糖核酸(DNA)后亚甲蓝溶液在其吸收峰666 nm波长处的吸收明显减弱(即色泽减褪),而且吸光度的减弱(△A)程度与DNA的质量浓度在10.0 mg·L-1以内保持线性关系,其相关系数为0.999 8,此反应对DNA的检出限为0.10 mg·L-1,分别以蛋白酶、胰蛋白酶及溶菌酶作为基体定量加入DNA配制成3种合成样品,按所提出方法进行分析,测得回收率结果在98.4%~101.0%之间,分析结果的RSD(n=11)值在1.1%~3.1%之间.对反应条件(包括亚甲蓝的浓度、反应的温度、酸度及时间等因素)作了试验和选定,还对反应机理作了简要的讨论.
关键词:分光光度法; DNA; 亚甲蓝;
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