一种快速测定发酵液中丙酮酸含量的简易方法
来源期刊:分析试验室2018年第11期
论文作者:王丙莲 马耀宏 公维丽 郑岚 杨艳 杨俊慧 司洪宇
文章页码:1303 - 1308
关键词:快速测定;发酵液;丙酮酸;酶电极;
摘 要:建立快速测定发酵液中丙酮酸含量的方法。利用酶固定化技术,将丙酮酸氧化酶(POD)及其辅酶(FAD)固定于核微孔膜,制备丙酮酸酶膜,并组装成丙酮酸酶电极,分析丙酮酸的含量。pH 7. 4,反应温度32℃,测定时间30 s。在酶电极最佳条件下,丙酮酸质量浓度在5~1200 mg/L范围内线性关系良好,检测限为3 mg/L;方法加标回收率为97. 1%~101. 8%,RSD为0. 68%。除高浓度NH+4外,不受丙酮酸发酵液中其他物质干扰物影响。丙酮酸发酵的实际应用中与HPLC法比较,测定结果无明显差异(P> 0. 05)。方法适用于实际发酵生产中丙酮酸含量的实时测定。
王丙莲1,2,马耀宏1,2,公维丽1,2,郑岚1,2,杨艳1,2,杨俊慧1,2,司洪宇5
1. 齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所2. 山东省生物传感器重点实验室5. 齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院能源研究所
摘 要:建立快速测定发酵液中丙酮酸含量的方法。利用酶固定化技术,将丙酮酸氧化酶(POD)及其辅酶(FAD)固定于核微孔膜,制备丙酮酸酶膜,并组装成丙酮酸酶电极,分析丙酮酸的含量。pH 7. 4,反应温度32℃,测定时间30 s。在酶电极最佳条件下,丙酮酸质量浓度在5~1200 mg/L范围内线性关系良好,检测限为3 mg/L;方法加标回收率为97. 1%~101. 8%,RSD为0. 68%。除高浓度NH+4外,不受丙酮酸发酵液中其他物质干扰物影响。丙酮酸发酵的实际应用中与HPLC法比较,测定结果无明显差异(P> 0. 05)。方法适用于实际发酵生产中丙酮酸含量的实时测定。
关键词:快速测定;发酵液;丙酮酸;酶电极;