微波辅助酶萃取-高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定灵芝中6种硒形态

来源期刊：理化检验-化学分册2020年第11期

论文作者：曾凤泽 姚宇泽

关键词：高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法;硒形态;硒总量;灵芝;

摘    要：在0.5g灵芝样品中加入10mL水和20mg蛋白酶XIV,在300W微波功率下37℃反应30min,以萃取出样品中的6种硒形态,包括硒酸[Se（Ⅵ）]、亚硒酸[Se（Ⅳ）]、硒代蛋氨酸（SeMet）、硒代胱氨酸（SeCys2）、硒代乙硫氨酸（SeEt）、甲基硒代半胱氨酸（SeMeCys）,萃取液经离心10min后,过0.22μm滤膜,滤液供高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）分析硒形态。以安捷伦ZORBAX SB-Aq C18色谱柱为固定相,以含5 mmol·L^-1庚烷磺酸钠的20mmol·L^-1柠檬酸溶液（pH 4.5）为流动相进行等度洗脱,在优化的仪器条件下,6种硒形态的保留时间分别为3.21,4.06,6.41,4.38,7.38,6.05min。在0.2g灵芝样品中加入3mL市售过氧化氢溶液和5mL硝酸,置于1 200 W微波功率下160℃消解30min,用5%（体积分数）盐酸溶液将消解液定容至25.0mL,供电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析硒总量,检测同位素为82Se。结果表明:6种硒形态的质量浓度在0.5～100.0μg·L^-1内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限（3S/N）为0.03～0.15μg·kg^-1;以灵芝样品为基质进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为91.7%～98.7%,测定值的相对标准偏差（n=6）为0.031%～3.2%。采用本方法对市售赤芝、紫芝、无柄紫芝、富硒赤芝等进行了硒形态分析,发现富硒赤芝中硒含量最高且种类最齐全。