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OPA-FMOC在线柱前衍生化HPLC法测定甘露聚糖肽中氨基酸组成及含量

来源期刊:分析试验室2016年第3期

论文作者:付迪 沈艳红 宛燕飞 张力 徐志珍 张文清 夏玮

文章页码:353 - 356

关键词:高效液相色谱法;邻苯二甲醛(OPA);9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC);衍生化;氨基酸;甘露聚糖肽;

摘    要:建立了OPA-FMOC在线柱前衍生化高效液相色谱法测定甘露聚糖肽中氨基酸组成及含量的方法,采用色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为40 mmol/L Na2HPO4缓冲溶液(pH 7.8);流动相B为甲醇:乙腈:水(45∶45∶10,V/V/V);梯度洗脱;流速:1.5 m L/min;柱温:40℃;检测波长:338,262 nm。20种氨基酸在53 min内得到较好地分离,各氨基酸在5500μg/m L范围内线性关系良好,相关系数在0.99410.9999之间;平均加标回收率在85.6%102.6%之间;检出限在0.568.33 ng(进样量1μL)范围内。甘露聚糖肽样品中含有16种氨基酸,氨基酸总量平均为3.56%(n=3)。

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OPA-FMOC在线柱前衍生化HPLC法测定甘露聚糖肽中氨基酸组成及含量

付迪1,沈艳红1,宛燕飞2,张力2,徐志珍1,张文清1,夏玮1

1. 华东理工大学上海市功能性材料化学重点实验室2. 成都利尔药业有限公司

摘 要:建立了OPA-FMOC在线柱前衍生化高效液相色谱法测定甘露聚糖肽中氨基酸组成及含量的方法,采用色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为40 mmol/L Na2HPO4缓冲溶液(pH 7.8);流动相B为甲醇:乙腈:水(45∶45∶10,V/V/V);梯度洗脱;流速:1.5 m L/min;柱温:40℃;检测波长:338,262 nm。20种氨基酸在53 min内得到较好地分离,各氨基酸在5500μg/m L范围内线性关系良好,相关系数在0.99410.9999之间;平均加标回收率在85.6%102.6%之间;检出限在0.568.33 ng(进样量1μL)范围内。甘露聚糖肽样品中含有16种氨基酸,氨基酸总量平均为3.56%(n=3)。

关键词:高效液相色谱法;邻苯二甲醛(OPA);9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC);衍生化;氨基酸;甘露聚糖肽;

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